Il soffitto fu forse iniziato da Callisto III (Alonso de Borgia - 1455-1458), ma essenzialmente realizzato sotto Alessandro VI (Rodrigo Borgia 1492-1503), quando era ancora cardinale (dal 1456) titolare della Basilica. Si tratta di un soffitto a cassettoni ricoperto con foglie d’oro, forse trasportato dai primi carichi provenienti dalle Americhe, dono grazioso dei reali di Spagna. Vi figurano due stemmi di Callisto III e tre di Alessandro VI, sotto il cui pontificato il soffitto fu completato.
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